Kā lietot seruma pudeli seruma inaktivācijai
Seruma kā barības vielai, kas nepieciešama šūnu augšanai, loma šūnu kultūrā ir pašsaprotama, un seruma kvalitāte un sterilitāte ir arī atslēgas, kas nosaka eksperimenta panākumus. Tātad, kā deaktivizēt serumu? Tam nepieciešams izmantot seruma pudeles.
Seruma inaktivācijas soļi ir šādi:
1. Izvēlieties pudeli, kas ir tāda pati kā seruma pudele, kā kontroles pudeli, ielejiet kontroles pudelē tādu pašu destilēta ūdens daudzumu kā serums un izmēriet temperatūru.
2. Temperatūras regulēšana. Ievietojiet divus dzīvsudraba termometrus kontroles grupas pudelē un ievietojiet tos ūdens vannā. Kad termometrs rāda 56 grādus, noregulējiet kalibrēšanas ūdens vannas temperatūru uz 56 grādiem.
3. Ielieciet seruma pudeli un kontroles pudeli kopā ūdens vannā, noregulējiet temperatūru līdz 56 grādiem un uz pusstundu ejiet ūdens vannā. Pēc inaktivācijas sadaliet tos pudelēs, veiciet aseptiskus eksperimentus un uzglabājiet -70--20 grādu temperatūrā.
4. Lai novērotu sasaldētā seruma krāsu un caurspīdīgumu, ja krāsa ir sarkanīga vai krāsa ir gaišāka ar nokrišņiem, tas nozīmē, ka seruma kvalitāte nav laba, tāpēc ir nepieciešams izvēlēties labas kvalitātes serumu inaktivācijai .
5. Lietojot serumu, jāizvairās no atkārtotas atkausēšanas, kas palielinās seruma piesārņojuma iespējamību un samazinās seruma kvalitāti. Ja atkārtoti atkausētais serums nogulsnējas, tas nozīmē, ka serums nav pieejams vai ir sliktas kvalitātes.
6. Lai nodrošinātu eksperimentālo rezultātu stabilitāti, sadalot pudeli, rūpīgi jāsakrata serums, pēc tam sadaliet pudeli un mēģiniet izmantot to pašu serumu, lai nodrošinātu vienādu mainīgo principu.
Iepriekš minētie ir specifiskie seruma inaktivācijas posmi, izmantojot seruma pudeles, taču ir vērts pieminēt, ka lielākajā daļā šūnu kultūru seruma termiskā inaktivācija nav nepieciešama. Daudzos gadījumos siltuma inaktivācija neuzlabo šūnu augšanu, bet gan iznīcina serumu un palielina nokrišņu daudzumu. Ja vien literatūrā nav norādīta inaktivēta seruma izmantošana šūnām, seruma termiskās inaktivācijas posmu šūnu kultūrai parasti var izlaist.
