Jauna koronavīrusa paraugu savākšanas un testēšanas tehniskā rokasgrāmata

Jun 16, 2021 Atstāj ziņu

Pamatprasības paraugu savākšanai

1. Hospitalizēto gadījumu paraugus savāc tās slimnīcas medicīnas personāls, kurā tie atrodas, un ciešo kontaktu paraugus savāc vietējā nozīmētā slimību kontroles aģentūra un ārstniecības iestāde. Ievācot paraugus, atbilstoši dažādiem savākšanas objektiem jāiestata dažādas paraugu ņemšanas zonas. Drudža pacienti dodas uz drudža klīnikām ārstēšanai un paraugu ņemšanai. Iestādēm, kurās nav drudža klīniku, ir jāizveido īpašas paraugu ņemšanas zonas drudža slimniekiem, kā arī drudža slimniekiem un citām testēšanas grupām, lai izvairītos no krustošanās. infekcija. 2. Asimptomātiskām inficētām personām, ieejas personālam un ciešiem kontaktiem ir jāsaņem nazofarneksa uztriepes nukleīnskābju testēšanai izolācijas un novērošanas laikā. Divi nazofaringeālie uztriepju paraugi ir jāsavāc vienlaikus, kad izolācija tiek atbrīvota, un attiecīgi testēšanai jāizmanto dažādi nukleīnskābju noteikšanas reaģenti. Principā sekundāro testēšanu veic dažādas testēšanas institūcijas. 3. Saskaņā ar klīnisko un laboratorisko pārbaužu vajadzībām hospitalizācijas un izolācijas laikā var ņemt vairākus paraugus, un vienlaikus var savākt vairākus paraugus, piemēram, elpceļu, asiņu un izkārnījumu. Paraugu ņemšanas personālam ir stingri jāievēro paraugu ņemšanas specifikācijas, lai savāktu paraugus, lai nodrošinātu, ka savākto paraugu kvalitāte atbilst prasībām. Tajā pašā laikā viņiem ir detalizēti jāreģistrē informācija par eksaminējamo un var izmantot svītrkoda skenēšanu un citas informācijas metodes, lai savāktu atbilstošu informāciju. 4. Populācijas skrīningam paraugu ņemšanas mēģenes jānosaka atbilstoši nukleīnskābju ekstrakcijai un noteikšanai izmantoto reaģentu prasībām, un var izvēlēties paraugu ņemšanas mēģenes, kas satur vīrusu inaktivācijas līdzekļus (guanidīna sāļus vai virsmaktīvās vielas utt.). Vīrusa izolēšanai izmantotais paraugs jāievieto paraugu ņemšanas mēģenē, kas nesatur vīrusu inaktivācijas līdzekli. 5. Preces un vides monitorings jābalsta uz monitoringa mērķiem un profilakses un kontroles vajadzībām, lai noteiktu paraugu ņemšanas vienumus, vietu un daudzumu, paraugu ņemšanai stingri jāievēro paraugu ņemšanas specifikācijas.

(4) Savākto īpatņu veidi. Katrā gadījumā ir jāievāc akūtu elpceļu paraugi (tostarp augšējo elpceļu vai apakšējo elpceļu paraugi). Smagos gadījumos vispirms ņem apakšējo elpceļu paraugus; izkārnījumu paraugus, veselu asiņu paraugus, seruma paraugus un fekāliju paraugus var savākt atbilstoši klīniskajām vajadzībām. Urīna paraugs. Izstrādājumi un vides paraugi tiek savākti saskaņā ar monitoringa prasībām.

Paraugu veidi: 1. Augšējo elpceļu paraugi: tostarp nazofaringeālie uztriepes, rīkles uztriepes utt. 2. Apakšējo elpceļu paraugi: dziļa klepus krēpas, alveolārais skalošanas šķidrums, bronhu skalošanas šķidrums, elpceļu aspirāts utt. 3. Izkārnījumu paraugi/anāls tamponi: jāsavāc apmēram 10 grami (zemesriekstu lielumā). Ja nav ērti glabāt izkārnījumu paraugus, var paņemt anālos uztriepes. 4. Asins paraugs: antikoagulantu asinis, savākšanas tilpums ir 5ml, asins savākšanai ieteicams izmantot vakuuma asinsvadu, kas satur EDTA antikoagulantu. 5. Seruma paraugi: mēģiniet savākt dubultus seruma paraugus akūtā un atveseļošanās fāzē. Pirmais serums jāsavāc pēc iespējas ātrāk (vēlams 7 dienu laikā pēc slimības sākuma), bet otrais serums jāsavāc 3 līdz 4 nedēļu laikā pēc slimības sākuma. Savākšanas tilpums ir 5 ml, un ieteicams izmantot vakuuma asins savākšanas cauruli bez antikoagulanta. Seruma paraugus galvenokārt izmanto antivielu noteikšanai, un nukleīnskābju noteikšanai netiek izmantoti. 6. Urīna paraugs: savāciet rīta urīnu, savākšanas tilpums ir 2–3 ml. 7. Virsmas paraugi: ieskaitot importēto aukstās ķēdes pārtiku vai importētās preces uz iekšējās un ārējās iepakojuma virsmas, kā arī transportēšanas un uzglabāšanas instrumenti un citas daļas, kuras var būt piesārņotas, savācot uztriepes. 8. Notekūdeņu paraugi: atbilstoši lielapjoma importēto saldēto preču apstrādes un attīrīšanas vietu kanalizācijas sistēmas sadalījumam jūras ostā, koncentrējieties uz notekūdeņu izplūdes atveres izvēli, iekšējo cauruļu tīkla savākšanu, notekūdeņu plūsmas lejup pa straumi vai savienojums ar pašvaldības cauruļu tīklu utt. 2 līdz 3 punkti Tiek ņemti biti.

(4) Paraugu ņemšana un apstrāde

  

1. Nazofarneksa uztriepe: paraugu ņēmējs ar vienu roku maigi atbalsta ņemamās personas galvu, bet ar otru tur uztriepi. Tampons iekļūst nāsī un lēnām iet dziļi pa apakšējās deguna ejas dibenu. Tā kā deguna eja ir izliekta, tas nav pieņemams. Pārmērīgs spēks, lai izvairītos no traumatiskas asiņošanas. Kad tampona gals sasniedz nazofaringeālā dobuma aizmugurējo sienu, to viegli pagrieziet nedēļu (refleksa klepus gadījumā palieciet kādu laiku), pēc tam lēnām izņemiet tamponu un iemērciet tampona galvu 2–3 ml. vīrusu konservēšanas šķīdums (var būt arī Izmantojiet izotonisku sāls šķīdumu, audu kultūras šķidrumu vai fosfāta buferšķīdumu), izmetiet asti un cieši pieskrūvējiet vāciņu.

  

2. Rīkles uztriepe: ņemamajai personai jāizskalo mute ar parasto fizioloģisko šķīdumu, un persona, kura ņem paraugus, samitrina tamponu sterilā fizioloģiskā šķīdumā (aizliegts ievietot tamponu vīrusu konservēšanas šķīdumā, lai izvairītos no alerģiju izraisītām antibiotikām), un personu, kas tiek savākta, nedaudz nolieciet galvu, atveriet muti un veiciet"ah" skaņu, atklājot mandeles no abām pusēm, uzlieciet tamponu pāri mēles pamatnei, ar nelielu spēku vismaz 3 reizes noslaukiet mandeles abās cilvēka pusēs un pēc tam noslaukiet uz augšu un uz leju rīkles aizmugurējā daļā. 3 reizes. Pēc tam iegremdējiet tampona galvu mēģenē, kurā ir 2–3 ml vīrusa konservēšanas šķīduma (var izmantot arī izotonisku sāls šķīdumu, audu kultūras šķidrumu vai fosfāta buferšķīdumu), izmetiet asti un cieši pieskrūvējiet mēģenes vāciņu. Rīkles uztriepi var ievietot arī tajā pašā mēģenē, kurā ir nazofaringeālā uztriepe.

3. Nazofaringijas ekstrakts vai elpceļu ekstrakts: izmantojiet kolektoru, kas savienots ar negatīvā spiediena sūkni, lai izvilktu gļotas no nazofarneksa vai izvadītu elpceļu sekrēciju no trahejas. Ievietojiet kolektora galvu deguna dobumā vai trahejā, ieslēdziet negatīvo spiedienu, pagrieziet kolektora galvu un lēnām izvelciet, savāciet ekstrahētās gļotas un vienu reizi izskalojiet kolektoru ar 3 ml paraugu ņemšanas šķidruma (var izmantot arī pediatrisko katetru, kas savienots ar 50 ml šļirci Alternatīvais savācējs).

  

4. Dziļas klepus krēpas: pēc tam, kad pacientam ir dziļš klepus, savāciet atklepotās krēpas paraugu ņemšanas mēģenē, kurā ir 3 ml paraugu ņemšanas šķidruma. Ja krēpas netiek savāktas paraugu ņemšanas šķidrumā, pirms testa var pievienot 2 līdz 3 ml parauga ņemšanas šķidruma vai pievienot tādu pašu daudzumu krēpu gremošanas sulas. Krēpu gremošanas sulas uzglabāšanas šķīduma formula ir parādīta 1. tabulā.

Lietojot, atšķaidiet uzglabāšanas šķīdumu līdz 50 ml ar dejonizētu ūdeni, samaisiet to ar tādu pašu krēpu tilpumu vai skatiet reaģenta lietošanas instrukcijas, vai izmantojiet vienādu krēpu tilpumu ar 1g/l proteināzi K saturošu fosfāta buferšķīdumu, lai pārvērstu. krēpas .

  

5. Bronhu skalošanas šķidrums: ievietojiet kolektora galvu no nāsis vai trahejas ligzdas trahejā (apmēram 30 cm dziļumā), injicējiet 5 ml parastā fizioloģiskā šķīduma, ieslēdziet negatīvo spiedienu, pagrieziet kolektora galvu un lēnām izvelciet, savāciet ekstrahētās gļotas, Un vienu reizi izskalojiet kolektoru ar paraugu ņemšanas šķīdumu, vai arī varat izmantot bērnu katetru, kas savienots ar 50 ml šļirci, lai aizstātu savākšanu.

  

6. Alveolārais skalošanas šķidrums: pēc vietējās anestēzijas ievietojiet optisko bronhoskopu caur muti vai degunu caur rīkli labās vidējās daivas vai kreisās plaušu mēles segmenta bronhā, ar tā augšdaļu ievietojiet bronhu atzara atverē un lēnām pievienojiet. caur trahejas biopsijas caurumu. Baktēriju fizioloģiskais šķīdums, 30-50 ml katru reizi, kopā 100-250 ml, nedrīkst pārsniegt 300 ml.

  

7. Izkārnījumu paraugs: paņemiet 1 ml parauga apstrādes šķīduma, paņemiet sojas pupiņas lieluma izkārnījumu paraugu un pievienojiet to mēģenei, viegli izpūtiet un iesūciet 3 līdz 5 reizes, ļaujiet tam nostāvēties istabas temperatūrā 10 minūtes, centrifugējiet pie 8000. apgr./min 5 minūtes un absorbē supernatantu. Atklāšana. Fekāliju paraugu apstrādes šķīdumu var pagatavot pats, un formula ir parādīta 2. tabulā.

HANK'S šķīdumu vai citu izotonisku sāls šķīdumu, audu kultūras šķidrumu vai fosfāta buferšķīdumu var izmantot arī, lai izšķīdinātu izkārnījumu paraugu, lai pagatavotu izkārnījumu suspensiju. Ja pacientam ir caurejas simptomi, paņemiet 3–5 ml fekāliju paraugu, viegli ar pipeti samaisiet, centrifugējiet ar ātrumu 8000 apgr./min 5 minūtes un uzsūciet supernatantu lietošanai.

  

8. Anālais tampons: izmantojiet sterilu vates tamponu, lai uzmanīgi ievietojiet to anālajā atverē 3–5 cm, pēc tam uzmanīgi pagrieziet to ārā, nekavējoties ievietojiet to 15 ml ārējā skrūvējamā parauga ņemšanas mēģenē, kurā ir 3–5 ml vīrusa konservēšanas šķīduma, izmetiet asti. un pagrieziet to. Pievelciet caurules vāciņu.

  

9. Asins paraugi: Lai savāktu 5 ml asins paraugus, ieteicams izmantot vakuuma asiņu savākšanas mēģenes, kas satur EDTA antikoagulantu. Atkarībā no izvēlētā nukleīnskābju ekstrakcijas reaģentu veida nukleīnskābju ekstrakcijai izmantojiet pilnas asinis vai plazmu. Lai atdalītu plazmu, centrifugējiet visas asinis ar ātrumu 1500-2000 apgr./min 10 minūtes un savāciet supernatantu sterilā plastmasas mēģenē ar skrūvējamu vāciņu.

  

10. Seruma paraugs: savāciet 5 ml asins parauga ar vakuuma negatīvā spiediena asins savākšanas stobri, atstājiet to istabas temperatūrā 30 minūtes, centrifugējiet ar ātrumu 1500-2000 apgr./min 10 minūtes un savāciet serumu sterilā plastmasas mēģenē ar skrūvējamu vāciņu.

  

11. Virsmas paraugi: skatiet&kvotā ieteikto metodi; Jaunā koronavīrusa vides uzraudzības tehniskās specifikācijas lauksaimniecības tirdzniecības (tirgus tirdzniecības) tirgū&kvotā; (WS/T776—2021). Pēc tam, kad parauga ņemšanas tampons ir pilnībā infiltrēts ar vīrusu konservēšanas šķīdumu, vēlreiz uzklājiet to uz virsmas un pēc tam uzklājiet tamponu. Ievietojiet to atpakaļ paraugu ņemšanas mēģenē un iemērciet to, izņemiet to un vēlreiz uzklājiet paraugu, atkārtojiet vairāk nekā 3 reizes. Vairāku punktu sadalīta paraugu ņemšana tiek veikta objektiem ar lielām virsmām.

  

12. Notekūdeņu paraugi: skatiet&kvotā ieteiktās metodes; Jaunā koronavīrusa vides uzraudzības tehniskās specifikācijas lauksaimniecības tirdzniecības (tirgus tirdzniecības) tirgū &. (WS/T776—2021). Savācot notekūdeņu tamponu paraugu, iegremdējiet tamponu adsorbētajos notekūdeņos un noņemiet tamponu. Novietojiet atpakaļ paraugu ņemšanas cauruli, lai uzsūktu, izņemiet to un vēlreiz iegremdējiet kanalizācijā, atkārtojiet vairāk nekā 3 reizes un veiciet vairāku punktu sadalītu paraugu ņemšanu katrā notekūdeņu paraugu ņemšanas vietā. Ievācot notekūdeņu paraugus, izmantojiet polietilēna plastmasas pudeles, lai savāktu 1L~1,5L notekūdeņu. Notekūdeņu savākšanai, kas lielāka par 1,5L, varat izmantot polietilēna plastmasas spaiņus vai īpašu bagātināšanas iekārtu ūdens paraugu ņemšanai uz vietas. Pirms notekūdeņu paraugu ņemšanas tie rūpīgi jāsamaisa un pēc tam jāņem paraugi; ja notekūdeņus ir grūti labi sajaukt un notiek noslāņošanās, paraugu ņemšanu var veikt slāņos atbilstoši katra slāņa ūdens tilpuma proporcijai.

  

13. Citi materiāli: savākt atbilstoši konstrukcijas prasībām un specifikācijām.

  

(5) Iepakojuma paraugs

  

Pēc paraugu savākšanas tie tiek iepakoti otrā līmeņa bioloģiskās drošības laboratorijas bioloģiskās drošības kabinetā.

1. Visi paraugi jāievieto piemērota izmēra paraugu savākšanas mēģenē ar skrūvējamu vāciņu un iekšpusē, kas ir izturīga pret sasalšanu, un jāpievelk. Parauga numurs, veids, nosaukums un parauga ņemšanas datums ir norādīts tvertnes ārpusē. 2. Ievietojiet aizzīmogotos paraugus noslēgtā maisiņā, katrā maisā ir tikai viens paraugs. Iepakojuma parauga prasībām jāatbilst"Tehniskie noteikumi drošai bīstamu kravu pārvadāšanai ar gaisa transportu". 3. Ja ir iesaistīta ārējo paraugu transportēšana, trīsslāņu iepakošana jāveic atbilstoši paraugu veidam un A vai B klases infekciozajām vielām.

  

(6) Eksemplāru saglabāšana

  

Vīrusa izolēšanai un nukleīnskābju noteikšanai izmantotie paraugi jāpārbauda pēc iespējas ātrāk. Paraugus, kurus var pārbaudīt 24 stundu laikā, var uzglabāt 4°C temperatūrā; paraugi, kurus nevar noteikt 24 stundu laikā, jāuzglabā -70°C vai zemākā temperatūrā (ja nē- Uzglabāt 70°C temperatūrā ledusskapī -20°C). Seruma paraugus var uzglabāt 4°C temperatūrā 3 dienas, un tos var uzglabāt ilgu laiku zem -20°C. Lai paraugus uzglabātu atsevišķi, ir jāizveido īpašas bibliotēkas vai speciāli skaitītāji.

  

(7) Iesniedziet paraugus pārbaudei

  

Paraugi jānosūta uz laboratoriju pēc iespējas ātrāk pēc savākšanas, un paraugus nedrīkst novietot istabas temperatūrā (25°C) ilgāk par 4 stundām pēc savākšanas. Ja nepieciešama transportēšana lielos attālumos, uzglabāšanai ieteicams izmantot sauso ledu un citas saldēšanas metodes. Izvairieties no atkārtotas sasaldēšanas un atkausēšanas paraugu transportēšanas laikā.

  

1. Nosūtiet paraugus

Visi sākotnējie vai agrīnie gadījumi vietējo epidēmiju laikā, kas atklāti dažādās provincēs (autonomajos reģionos un pašvaldībās), galvenie gadījumi, kas saistīti ar agrīno gadījumu epidemioloģiju, vietējie gadījumi ar nezināmiem infekcijas avotiem, ievesti gadījumi no ārzemēm, importētas preces un ar to saistītā vide pozitīvi paraugi utt. Paralēli jāievāc vismaz 2 paraugi, viens tiek nosūtīts katrai provinces slimību kontroles aģentūrai testēšanai, otrs tiek nosūtīts Ķīnas Slimību kontroles un profilakses centram testēšanai un pārskatīšanai, kā arī parauga iesniegšanas veidlapa. ir pievienots (skat. 10-1. pielikumu). Jauni reprezentatīvie celmi, kas izolēti no dažādām provincēm, nekavējoties jānosūta uz Ķīnas Slimību kontroles un profilakses centriem pārskatīšanai un saglabāšanai.

  

2. Paraugu un celmu transportēšana

(1) Jaunu koronavīrusa celmu vai citu potenciāli infekciozu bioloģisku materiālu iekšzemes transportēšana ir klasificēta kā A klase, un atbilstošais ANO numurs ir UN2814. Iepakojums atbilst PI620 klasifikācijai ICAO dokumentā Doc9284"Tehniskās instrukcijas drošai bīstamu kravu pārvadāšanai ar gaisa transportu" Iepakojuma prasības: vides paraugi pieder B kategorijai, un atbilstošais ANO numurs ir UN3373. Iepakojums atbilst PI650 klasifikācijas prasībām ICAO dokumentā Doc9284"Tehniskie noteikumi drošai bīstamu kravu pārvadāšanai ar gaisa transportu"; iepriekš minēto standarta iepakojumu var attiecināt uz transportēšanu ar citiem transporta līdzekļiem. Jaunu koronavīrusa celmu vai citu potenciāli infekciozu materiālu transportēšana jāveic saskaņā ar"Administrative Regulations on Transportation of Highly Patogenic Mikroorganismu (vīrusu) sugu vai paraugu, kas var inficēt cilvēkus" (iepriekš Veselības ministrijas rīkojums Nr. 45) par&kvotu;Transportēšanas atļaujas sertifikāts&kvotu; .

(2) Starptautiskie pārvadājumi Jaunā koronavīrusa paraugus vai celmus, kas tiek pārvadāti starptautiski, iepako standartizētā veidā, iziet attiecīgās procedūras saskaņā ar&kvotu; Noteikumi par sanitāro un ievešanas karantīnas administrāciju un Izejiet no īpašajiem rakstiem" un izpildiet attiecīgās valsts un starptautiskās prasības.

(3) Paraugu un vīrusu celmu saņemšana un pārvaldība. Paraugi, kas transportēti ar gaisa transportu, nonāk galamērķa lidostā un tiek nogādāti ar profesionāliem transporta līdzekļiem uz saņēmēju vienību. Pa sauszemi transportētie eksemplāri tiek transportēti ar profesionāliem transportlīdzekļiem. Pārvadātājiem un saņēmējiem paraugiem jāsaņem dubultā zīme. Jaunā koronavīrusa paraugi un celmi jāpārvalda īpašai personai, precīzi jāreģistrē paraugu un celmu avots, veids, daudzums un skaita reģistrācija, jāveic efektīvi pasākumi, lai nodrošinātu celmu un paraugu drošību un stingri novērstu ļaunprātīga izmantošana, zādzība un zādzība. Laupīšana, nozaudēšana, noplūde un citi incidenti.

  02

Jaunā koronavīrusa laboratoriskā pārbaude