Ko nozīmē PCR nukleīnskābju noteikšana, metodes un soļi
Nukleīnskābju pārbaude pašlaik ir efektīvs veids, kā noteikt, vai vīruss pārnēsā jauno koronavīrusu. Pašlaik cilvēki uzziņai galvenokārt izmanto deguna uztriepes, rīkles uztriepes un antivielu seruma lgm. Bet saskaņā ar jaunākajām Singapūras ieceļošanas prasībām tiek veikta PCR nukleīnskābju pārbaude, ko tad nozīmē PCR nukleīnskābju pārbaude?
Ko nozīmē PCR nukleīnskābju noteikšana
PCR nozīmē polimerāzes ķēdes reakciju, ko var izmantot DNS pastiprināšanai, lai pastiprinātu nelielu DNS daudzumu, lai to varētu noteikt. Dažu vīrusu nukleīnskābe ir DNS, un šī metode ir jāizmanto noteikšanai. Tāpēc PCR nav veikta pārbaude, bet gan DNS noteikšanas metode. Piemēram, B hepatīta vīrusa DNS kvantitatīvai noteikšanai izmanto šo metodi. DNS pārbaudes mērķis ir, no vienas puses, diagnosticēt slimību. Ja var konstatēt pat patogēna DNS, tas nozīmē, ka patogēns ir inficēts; no otras puses, tas ir, lai novērtētu, cik daudz vīruss ir replikēts, lai spriestu par slimības smagumu vai ārstēšanas ietekmi.
PCR nukleīnskābju noteikšanas metodes un soļi
Nukleīnskābju testēšanai ir nepieciešami pieci soļi: paraugu ņemšana, parauga saglabāšana, aizturēšana, nukleīnskābju ekstrakcija un datortestēšana.
Pirmais solis nukleīnskābju noteikšanā ir savākt cilvēka sekrēcijas un noslaucīt deguna dobumu vai rīkles aizmugurējo sienu un abpusējās rīkles mandeles ar deguna testu vai rīkles testu.
Otrajā solī medicīnas darbinieki paturēja paraugu, iegremdēja testa parauga galvu šūnu konservēšanas šķīdumā un tūlīt pēc astes pārrāvuma uzskrūvēja mēģenes vāciņu.
Trešajā daļā ielieciet paraugu hermētiskā maisiņā, saglabājiet to un savlaicīgi nosūtiet pārbaudei.
Ceturtais solis ir parauga nosūtīšana uz laboratoriju, lai ekstrahētu nukleīnskābi.
Piektajā posmā ekstraktu pakļauj fluorescējošai PCR amplifikācijas reakcijai.
Kas ir nukleīnskābe
Nukleīnskābe (nukleīnskābe) ir bioloģiskas makromolekulas veids, kas sastāv no nukleotīdiem (nukleotīdiem), kas sadalīti ribonukleīnskābē (RNS) un dezoksiribonukleīnskābē (DNS), kurā RNS pārsvarā ir vienas ķēdes struktūra, DNS pārsvarā ir divpavedienu struktūra. Papildus prionam nukleīnskābe ir dzīvībai nepieciešama bioloģiska makromolekula. Tās galvenā funkcija ir būt par dzīvības ģenētiskās informācijas nesēju. Turklāt dažas nukleīnskābes var izmantot kā bioloģiski aktīvo enzīmu veidošanos un piedalīties tajos. Molekulas vai citas molekulārās mašīnas.
Kas ir nukleīnskābju pārbaude
Nukleīnskābju noteikšana, kā norāda nosaukums, ir nukleīnskābju noteikšana.
Kādas ir nukleīnskābju testēšanas unikālās priekšrocības? Kāpēc to var izmantot kā"zelta standarta" lai diagnosticētu jaunu koronavīrusu?
Faktiski katrai noteikšanas metodei ir savi pielietojuma scenāriji. Par piemēru ņemot vīrusa noteikšanu, parasto imunoloģisko noteikšanas metožu (koloidālais zelts, ELISA, hemiluminiscence utt.) noteikšanas objekts ir vīrusa antigēns vai antiviela, kas ir līdzvērtīga"side zīmējumam". Tā kā no infekcijas līdz noteikšanai ir laika logs, imunoloģiskās noteikšanas metodes parasti nav piemērotas agrīnai diagnostikai.
Ko nozīmē PCR nukleīnskābju noteikšana, metodes un soļi
Viltus pozitīvi un viltus negatīvi
1. Viltus pozitīvs
Parasti ir mazāk viltus pozitīvu rezultātu. Parasti nepareiza laboratorijas personāla darbība var izraisīt paraugu savstarpēju inficēšanos vai pastiprināto produktu atlikušo piesārņojumu. Šajā gadījumā var rasties kļūdaini pozitīvi rezultāti.
Tomēr viltus pozitīvus rezultātus var efektīvi apiet, stingri kontrolējot noteikšanas procesu un ieviešot stratēģiju, saskaņā ar kuru nejauši piedalās vairāku negatīvu paraugu noteikšanā.
2. Viltus negatīvs
Šeit ir jāpaskaidro, ka viltus negatīvie rezultāti PCR noteikšanā un klīniskie viltus negatīvie faktiski nav viens un tas pats jēdziens.
Kā piemēru ņemot jaunā koronavīrusa diagnozi, par kuru tiek spraigi apspriests internetā, klīniski viltus negatīvi ir gadījumi, kad klīniskajos simptomos un attēlveidošanas pētījumos ir lielas aizdomas par inficēšanos, bet PCR tests atkārtoti vai vienmēr ir negatīvs; un PCR tests viltus negatīvs attiecas uz savākto Paraugā ir pietiekams daudzums jaunā koronavīrusa, bet tas nav konstatēts.
Lai izvairītos no viltus negatīviem nukleīnskābju testiem, galvenās problēmas, kas jāatrisina, ir šādas: (1) inficētās personas šūnās ir pietiekami daudz vīrusa, (2) vīrusu saturošās šūnas var savākt savāktajā paraugā un (3) ) paraugā esošais vīruss tiek atklāts Šīs trīs saites.
Starp tiem PCR komplektu tehniskie parametri galvenokārt ietekmē trešo noteikšanas saiti.
Tikai trešajai testa saitei, ja vīrusu skaits paraugā ir zem noteikta līmeņa (zem minimālās noteikšanas robežas), PCR komplekts to nevarēs noteikt. No šī viedokļa nevar pilnībā izvairīties no viltus negatīviem PCR noteikšanā. Tāpēc ir nepieciešams papildināt vīrusu specifisko antivielu testēšanas izstrādi.